一、基础信息
- 中文名称:伊格林蛋白 C (41–49) 片段
- 英文名称:Eglin c Fragment (41–49)
- 三字母序列:Ser-Pro-Val-Thr-Leu-Asp-Leu-Arg-Tyr
- 单字母序列:SPVTLDLRY
- 氨基酸数量:9 aa
- 分子式:C48H78N12O15
- 分子量:1063.22
- 结构修饰:线性天然截短肽,无 N 端乙酰、无 C 端酰胺、无二硫键、无环化修饰
- 结构式:
二、理化性质
- 紫外定量:含 Tyr,280 nm 有特征紫外吸收,可直接紫外分光光度法测浓度;不含 Trp、Phe。
- 稳定性:无 Cys、Met,不易氧化;仅 Tyr 为光敏氨基酸,配液、储存条件建议避光,常温干粉稳定性优异。
- 酸碱特性:酸性残基 Asp、碱性残基 Arg 共存,整体近中性,等电点靠近生理 pH;在 pH 6.8–7.6 缓冲环境稳定性最佳,适配 pH7.2~7.4 PBS、细胞培养液、HEPES 缓冲液。
- 溶解性:Ser、Thr 为强亲水羟基氨基酸,Asp、Arg 带电荷,整体水溶性优良,纯水、中性缓冲液常温极易溶解;高低温条件下不易析出沉淀。
- 空间构象:序列含 Pro 残基,在肽链中引入固定转角,整体呈部分有序构象,是 Eglin c 蛋白酶抑制活性关键结合区段,Pro 位点维持和靶酶的空间匹配。
三、来源背景
Eglin c 天然源自水蛭唾液,是高选择性丝氨酸蛋白酶天然抑制剂;41–49 为 Eglin c 活性中心关键表位片段,保留与靶蛋白酶结合的核心氨基酸基序,常用于体外替代全长 Eglin c 做结合试验,区别于全长 70 aa 天然 Eglin c 大分子蛋白。
四、生物学功能
- 竞争性抑制丝氨酸蛋白酶:靶向结合弹性蛋白酶、组织蛋白酶 G、糜蛋白酶等丝氨酸水解酶活性口袋,阻断底物结合位点,抑制酶催化活性。
- 抗炎调控:抑制炎症过程中过度释放的中性粒细胞弹性蛋白酶,减少蛋白酶介导的组织水解损伤,减轻局部组织炎症浸润与破坏。
- 抗组织降解:阻断蛋白酶对胞外基质蛋白(胶原蛋白、弹性蛋白)的水解,保护结缔组织完整性。
五、科研应用
- 丝氨酸蛋白酶抑制剂筛选:作为阳性对照抑制剂,用于弹性蛋白酶体外酶活筛选、抑制剂 IC50 测定。
- 炎症损伤机制研究:用于肺损伤、皮肤炎症、急性胰腺炎相关体外细胞模型,探究弹性蛋白酶介导病理损伤通路。
- 抑制剂构效关系研究:截短肽与全长 Eglin c 对比,明确 41–49 区段为核心抑制基序,指导小分子 / 多肽类抗炎抑制剂改造。
- 生化酶学实验:蛋白纯化体系中,添加该肽抑制杂蛋白水解,保护目标蛋白不被内源蛋白酶降解。
六、溶解与储存规范
- 溶解:无菌中性 PBS 或超纯水常温溶解即可,因含 Tyr,配制全程避光操作。
- 冻干粉保存:短期(1–3 个月)密封 - 20 ℃避光保存;长期(>6 个月)分装密封 - 80 ℃。
- 工作液:按单次实验用量分装,避免反复冻融;2–8 ℃避光水溶液可存放 7 天左右。