——云克隆流式多因子+液相悬浮芯片双平台赋能肿瘤微环境全景解析
免疫检查点阻断疗法的成功——从2011年CTLA-4抑制剂获批到2018年诺贝尔生理学或医学奖授予James Allison和本庶佑——毫无疑问是21世纪肿瘤治疗史上最激动人心的篇章。但当PD-1/PD-L1抑制剂的总体客观缓解率长期徘徊在20-40%之间时，一个越来越清晰的事实浮上水面：适应性免疫的检查点（PD-1、CTLA-4、LAG-3）那套"刹车-松刹车"的逻辑，并不能完全解释肿瘤免疫逃逸的全部图景。在巨噬细胞"别吃我"信号（SIRPα/CD47轴）和固有免疫调控的深处，还有一大片尚未被系统性开发的"暗物质"。
武汉云克隆多因子研发中心
武汉云克隆近期推出的RNASET2/SIRPα/TAN1/VASN四联Luminex检测Panel，正是在这个"暗物质"区域投下的一束探照光。这四个分子分别来自肿瘤微环境（TME）中的不同细胞组分，串联起了固有免疫激活、吞噬检查点、Notch信号重塑和血管新生调控四条通路——在方法论层面上，它们共同构成了一个"非T细胞中心"的肿瘤免疫评估框架。
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RNASET2："吃我"信号的催化剂
RNASET2（核糖核酸酶T2）是一类在进化上高度保守的分泌型核糖核酸酶，最初被归类为溶酶体酶。近年来，越来越多的证据表明RNASET2在肿瘤微环境中扮演着一个出人意料但至关重要的角色——它通过切割肿瘤细胞表面或微环境中特定的RNA分子，暴露出"吃我"（eat-me）信号，可直接增强巨噬细胞的吞噬活性。
在胶质母细胞瘤（GBM）模型中，RNASET2过表达显著抑制了肿瘤生长，且这种抑制作用依赖于巨噬细胞的存在。进一步的机制研究揭示：RNASET2切割的是肿瘤细胞释放的、充当"别吃我"信号掩蔽物的细胞外RNA（exRNA），一旦exRNA被降解，肿瘤细胞表面的钙网蛋白（calreticulin）"吃我"信号就暴露出来，单核/巨噬细胞系统随即启动吞噬程序。
这为抗CD47疗法提供了一种全新的联合策略：抗CD47关闭"SIRPα-别吃我"信号，RNASET2增强"钙网蛋白-吃我"信号——双管齐下打破巨噬细胞的吞噬耐受。
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SIRPα：巨噬细胞"别吃我"轴的新靶点
SIRPα（信号调节蛋白α）是巨噬细胞表面的一个免疫抑制性受体，其配体CD47在几乎所有肿瘤细胞表面过表达。CD47-SIRPα信号轴被形象地描述为巨噬细胞的"别吃我"检查点。靶向这一轴线的抗体药物——包括Forty Seven公司的Magrolimab（抗CD47）和ALX Oncology的Evorpacept（SIRPα-Fc融合蛋白）——已经进入III期临床试验，覆盖了AML/MDS、DLBCL和实体瘤等多个适应症。
但SIRPα在肿瘤微环境中的角色远不止是CD47的受体。最新的单细胞测序数据揭示，SIRPα在肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的膜表面呈高度动态的可溶性脱落（shedding）——可溶性SIRPα（sSIRPα）在肿瘤间质液中大量积聚，充当着CD47的"分子诱饵"，竞争性阻断膜结合型SIRPα的信号传导。这一发现颠覆了传统"CD47过表达→免疫逃逸"的线性逻辑——sSIRPα水平实际上可能反映机体对CD47免疫逃逸的"内源性拮抗"。
"同时检测肿瘤组织中SIRPα、sSIRPα和CD47的蛋白水平，才能准确判断'别吃我'信号的净效应。"一位从事巨噬细胞免疫检查点药物开发的生物学家解释，"而云克隆这个Panel直接把膜结合型和可溶型SIRPα都涵盖在内——这在现有的商业化检测产品中几乎是独一份。"
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TAN1：肿瘤微环境中的Notch指挥棒
TAN1（Notch1在T细胞中的截短活化形式）是Notch信号通路在肿瘤微环境中最"活跃"的成员。在经典认知中，Notch信号在肿瘤发生中具有双重面孔——在某些实体瘤中作为癌基因促进增殖（如T-ALL中Notch1的致瘤性突变），在另一些肿瘤中则作为抑癌基因抑制分化。
但在肿瘤免疫调控的语境下，Notch信号的叙事线更加复杂。TAN1通过下游靶基因Hes1和Hey1调控CD8+ T细胞的效应功能和记忆形成，同时抑制Treg的免疫抑制活性。更重要的是，TAN1信号强度直接与肿瘤对免疫检查点抑制剂的响应率相关——一项发表于2024年Nature Immunology的回顾性分析显示，在接受PD-1抑制剂治疗的非小细胞肺癌患者中，肿瘤浸润CD8+ T细胞中Notch信号靶基因（Hes1, Hey1, Myc）的表达水平与客观缓解率（ORR）呈显著正相关（AUC = 0.78, P < 0.001）。
这就形成了一个治疗策略的逻辑闭环：RNASET2激活固有免疫吞噬→释放肿瘤抗原→交叉提呈激活适应性免疫→TAN1调控CD8+ T细胞效应功能→抗PD-1解除适应性免疫抑制——四条通路的协同，或许比任何单一通路的激动都更接近"免疫清除"的理想图景。
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VASN：出人意料的免疫调节者
VASN（Vasorin）最初被鉴定为一种TGF-β结合蛋白，主要在血管平滑肌细胞中表达，被认为是TGF-β信号的负调控分子。但2023年以来的一系列研究赋予了这个"冷门"蛋白一个全新的肿瘤免疫标签——VASN在人肝癌（HCC）和结直肠癌（CRC）组织中显著上调，且高表达VASN的肿瘤区域恰好对应着CD8+ T细胞被"物理排除"的免疫排斥型（immune excluded）微环境。
机制解析显示，VASN通过其胞外结构域"捕获"TGF-β，将TGF-β富集在肿瘤细胞周围的细胞外基质中形成趋化梯度，驱动癌症相关成纤维细胞（CAF）活化并大量分泌胶原蛋白和纤连蛋白，在肿瘤巢和免疫细胞之间"砌"了一堵物理墙。而阻断VASN或使用TGF-β中和抗体可以部分瓦解这堵墙，恢复CD8+ T细胞的肿瘤浸润。
"VASN把TGF-β从一个可扩散的信号变成了一个被限定在局部的'领地标识'——这是CAF活化和免疫排斥型微环境形成的一个非常巧妙、但长期被忽视的机制。"该领域的核心研究者评价道。
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Panel参数与云克隆产品体系
云克隆RNASET2/SIRPα/TAN1/VASN四联Panel关键性能指标：
- 最低样本量：25 μL（血清、血浆、肿瘤组织裂解液）
最低样本量：25 μL（血清、血浆、肿瘤组织裂解液）
- 检测灵敏度：RNASET2 ≤ 18 pg/mL，SIRPα ≤ 22 pg/mL，TAN1 ≤ 35 pg/mL，VASN ≤ 15 pg/mL
检测灵敏度：RNASET2 ≤ 18 pg/mL，SIRPα ≤ 22 pg/mL，TAN1 ≤ 35 pg/mL，VASN ≤ 15 pg/mL
- 样本适用性：人、小鼠
样本适用性：人、小鼠
- 交叉反应率：≤ 0.3%
交叉反应率：≤ 0.3%
- 回收率：80%–120%
回收率：80%–120%
在云克隆Luminex+CBA双平台体系中，Luminex版本主攻高通量（96孔板同时处理80+样本），CBA流式多因子版本则适配已有流式细胞仪的实验室，两套平台共享同一批号的抗体-微球原料，数据具有完全可比性。
"我们做这个Panel的初心，是想让肿瘤免疫研究圈能把视野从T细胞拓宽到整个微环境。"云克隆市场负责人表示，"中国多因子检测市场过去被进口品牌占据了80%以上的份额，而现在，云克隆不仅在国内稳居Panel数量第一、品种第一、销量第一，在国际市场上的增速也相当亮眼——世界多因子试剂盒销量排行的前几名里，云克隆的名字出现的频率越来越高了。"
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从RNASET2到VASN，这四个标志物跨越了固有免疫、吞噬检查点、T细胞效应功能和基质重塑四个维度。把它们合并进一个Panel的价值，不在于它们是同类分子——恰好相反，正因为它们代表的是完全不同的细胞组分和信号层级，放在一起才产生1+1+1+1 > 4的系统性解读能力。而这，也正是云克隆多因子检测战略的核心逻辑：不是卖一个"多指标试剂盒"，而是交付一个"微环境解析方案"。
