一、基础信息
- 中文全称:N 端生物素修饰大鼠甘丙肽
- 英文全称:Biotinyl-Galanin (rat)
- 三字母序列:Biotin-Gly-Trp-Thr-Leu-Asn-Ser-Ala-Gly-Tyr-Leu-Leu-Gly-Pro-His-Ala-Ile-Asp-Asn-His-Arg-Ser-Phe-Ser-Asp-Lys-His-Gly-Leu-Thr-NH₂
- 单字母序列:Bio-GWTLNSAGYLLGPHAIDNHRSFSDKHGLT-NH₂
- 氨基酸总数:30 aa
- 分子式:C141H211N43O41
- 分子量:3164.50
- 修饰说明:
- N 端氨基接生物素(Bio);
- C 端 Thr 酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 线性多肽,含 Pro 形成 β 转角;无环化、二硫键、焦谷氨酸、侧链修饰。
- 结构式:
二、理化性质
- 紫外定量:含 Trp、Tyr、Phe,280 nm 紫外吸收明显,可直接紫外分光光度法测浓度。
- 稳定性要点
无 Met、Cys,无氧化隐患;Trp/Tyr/Phe 为光敏残基,全程避光操作;
N 端生物素 + C 端酰胺双重封端,耐氨基肽酶与羧肽酶,但长肽易被内肽酶降解,工作液现配现用。 - 酸碱特性
酸性残基:Asp;碱性残基:His、Arg、Lys;整体弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、大鼠下丘脑 / 肠道细胞培养液、大鼠血浆缓冲液。 - 溶解性
Ser、Thr、Asn、Gly 亲水骨架搭配带电氨基酸,水溶性极佳,中性缓冲液常温完全溶解。 - 空间构象
N 端 GWTLNSAGYLL 为受体关键结合区,Pro 形成稳定转角;N 端生物素远离结合口袋,不影响 GALR1/GALR2/GALR3 受体亲和力。
三、来源背景
甘丙肽是大鼠中枢、外周广泛表达的神经内分泌肽,调控食欲、痛觉、胃肠、激素分泌;N 端生物素标记作为大鼠专属亲和探针,用于受体 Pull-down 与配体竞争实验。
四、生物学功能
- 激活 GALR1/2/3 受体,抑制胰岛素、生长激素释放;调控摄食、镇痛、焦虑、睡眠;
- 抑制胃酸分泌、减缓胃肠蠕动,调节肠道内分泌;
- 参与神经损伤、情绪中枢信号调控;
- 生物素可结合链霉亲和素,富集细胞膜甘丙肽受体及下游互作蛋白,荧光示踪受体分布与内吞。
五、科研应用
- 大鼠下丘脑、小肠原代细胞 Pull-down 捕获 GALR 受体及信号蛋白;
- GALR 亚型选择性激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验;
- 大鼠肥胖、疼痛、焦虑、胃肠功能紊乱体外细胞模型;
- 人源 / 大鼠甘丙肽跨物种序列、受体亲和力对比;
- 免疫荧光可视化脑组织、胃肠道 GALR 受体定位。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 常温避光配制,无需冰浴防氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装 - 80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2–8 ℃避光可稳定 7–10 天。